使(shi)用高(gao)精(jing)度(du)激光(guang)雕(diao)刻(ke)機(ji)加(jia)工(gong)微(wei)流(liu)控芯片可(ke)完成(cheng)此次(ci)試驗!
目(mu)前對於心(xin)肌(ji)標誌(zhi)物的檢(jian)測,大(da)多(duo)是基於(yu)抗原(yuan)抗體(ti)的(de)免疫反應(ying).生物(wu)學家(jia)通常利(li)用熒光(guang)物(wu)質 標記(ji)抗原(yuan)或抗體(ti)或(huo)酶(mei)標抗體(ti),然(ran)後從(cong)反應(ying)生成(cheng)物(wu)的(de)熒光(guang)強(qiang)度(du)、反應(ying)底物(wu)比色(se)和(he)捕(bu)獲(huo)化(hua)學發(fa)光(guang)底(di)物微(wei)光(guang)來定量(liang)被(bei)檢(jian)測物(wu)的(de)濃度(du).底物(wu)可(ke)見(jian)光(guang)比色(se)法因(yin)靈(ling)敏(min)度(du)相對較低,壹(yi)般無(wu)法滿足低濃(nong)度(du)心(xin)肌(ji)標誌(zhi)物的檢(jian)測需(xu)求,應(ying)用較(jiao)少.而(er)熒光(guang)免(mian)疫方法因(yin)具(ju)高靈(ling)敏(min)度(du)而被(bei)多(duo)數研(yan)究者(zhe)采納(na).
對於微(wei)流(liu)控芯片微(wei)米級的(de)檢(jian)測通(tong)道,熒光(guang)免(mian)疫方法有時並不能(neng)滿足低濃(nong)度(du)心(xin)肌(ji)標誌(zhi)物的檢(jian)測要(yao)求(qiu).為(wei)此,有團隊(dui)創造性(xing)地設(she)計(ji)了(le)濃(nong)縮熒光(guang)標(biao)記(ji)物(wu)的(de)反應(ying)池和(he)嵌入式光(guang)電倍增管(guan)檢(jian)測裝(zhuang)置(zhi),實現了(le)對C反應(ying)蛋(dan)白(C-Reactive Protein,CRP)的低濃(nong)度(du)檢(jian)測.其(qi)具(ju)體(ti)實驗(yan)過程如下:首先(xian)制(zhi)作(zuo)了(le)帶1mm×0.8mm×30um預(yu)濃(nong)縮反應(ying)池的(de)T型聚(ju)二甲基(ji)矽氧(yang)烷(Polydimethylsiloxane,PDMS)芯(xin)片,在反應(ying)池中(zhong)設(she)計(ji)物(wu)理微(wei)結構富集CRP抗體(ti)包被(bei)的(de)磁(ci)珠;然後將(jiang)熒光(guang)標(biao)記(ji)的(de)CRP抗原(yuan)和(he)待檢(jian)測CRP抗原(yuan)註(zhu)入(ru)反應(ying)池,孵(fu)育後洗(xi)脫(tuo)熒光(guang)標(biao)記(ji);最(zui)後在反應(ying)池下遊微(wei)通道利(li)用嵌入(ru)式光(guang)電倍增管(guan)檢(jian)測熒光(guang)信(xin)號,結果(guo)測得CRP最(zui)低檢(jian)測限(xian)為(wei)1.4 nmol/L.該方法有效(xiao)地提高(gao)了(le)檢(jian)測的(de)靈(ling)敏(min)度(du),但缺(que)點(dian)在於磁(ci)珠修飾抗體(ti)和(he)熒光(guang)標(biao)記(ji)抗原(yuan)等(deng)操(cao)作(zuo)都(dou)必(bi)須在芯片外(wai)進行,檢(jian)測時間(jian)相對較長(chang).